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PCR實驗室在建設的過程中應注意問題

文章作者:PCR實驗室 發布時間:2020-11-19 15:09:24 瀏覽次數:0
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  今天,德州樱桃短视频网址入口2020淨化為大家再講下PCR實驗室在建設的過程中應注意問題:

  1.規範的安裝流程和全麵的服務流程。

  2.嚴格按照規範科學設計的安裝流程。

  3.安裝前需要確定以下安裝條件,如:電源電壓,電源進線位置,電話網絡線進線位置,進水水壓,最小安裝空間,地麵平整度,通風孔、進水管和下水管的位置等,理想狀態的空間尺寸和通風口尺寸。

PCR實驗室

  設計要點:

  PCR實驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實驗,通常應經過試劑配製、樣品處理、核酸擴增及產物分析四個實驗過程,若實驗工藝需要,還應增加樣品粉碎過程。

  一、分散形式PCR實驗室:

  所謂分散形式PCR實驗室,是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,呈分散布置形式。對於這種布置形式的PCR實驗室,由於各個實驗之間不易相互幹擾,因此無需特殊條件要求。

  二、組合形式PCR實驗室:

  所謂組合形式PCR實驗室, 是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,組成獨立實驗區域的形式。對於組合形式PCR實驗室,由於各個實驗間集中布置,容易造成相互幹擾,因此,對總體布局以及屏障係統具有一定的要求。各室在入口處設緩衝間,以減少室內外空氣交換。

  說到這裏再為大家補充些經驗:

  試劑配製室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成汙染;可以通過控製進風風量大於排風風量達到正壓效果。

  核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去汙染試劑與樣品,可以通過控製排風風量大於進風風量達到負壓效果。

  在理想情況下,PCR實驗室緩衝間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內。 PCR實驗室進風由原有中央空調控製,要求將中央空調風口安裝到指定定點,且高度為地麵鋪裝好後2600mm處。

  如果使用熒光PCR儀,擴增室和產物分析室可以合並。若房間進深允許,可設PCR內部專用走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方麵,緩衝間比專用走廊更有意義。

  各個區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互幹擾,防止核酸氣溶膠對實驗過程造成汙染產生假性結果。

  實驗室的牆體,包括頂棚,應結構牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過渡;牆體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地麵材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

  PCR實驗室主要設備

  試劑準備區:

  儀器設備主要有冰箱、超淨台、加樣器、混勻器、天平和離心機等,加樣器、天平除了要專用外,還應有定期校準。試劑分裝應在超淨台中進行,擴增反應混合液應使用分子生物學級的,試劑製備好後應有質檢:一是否有汙染、二是檢測試劑的擴增效果。

  標本製備區:

  儀器設備主要有生物安全櫃、加樣器、離心機、溫育儀、混勻器等

  擴增區:

  擴增區的主要儀器是核酸擴增儀、超淨台、微量加樣器、離心機、可移動紫外燈。擴增儀需進行校準。並配備UPS電源,以防止由於電壓的波動,停電對擴增效果的影響。

  分析區:

  本區所使用的儀器設備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等 潔淨實驗區的緩衝間部分麵積不能超過主實驗室的八分之一,這是有規定的。

  一些瑣碎的、不可忽略的設計:

  1.實驗室空調通風係統設計及壓力控製:

  PCR實驗室並沒有嚴格的淨化要求,但是為避免各個實驗區域間交叉汙染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴格控製送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。

  2.汙染的預防與控製:

  PCR實驗室設計的核心問題是如何避免汙染。在實際工作中,常見的有以下幾種汙染類型:擴增產物的汙染;天然基因組DNA的汙染;試劑的汙染以及標本間的汙染。由於一旦發生汙染,實驗就必須停止,直到找到汙染源為止,而且實驗結果必須作廢,需重新進行實驗。所以發生汙染後再圍繞實驗室來尋找汙染源不但耗時而且繁瑣,浪費人力物力。因此要避免汙染,首先應是預防,而不是排除。

PCR實驗室

  PCR實驗室不可缺少的嚴格管理:

  (1)嚴格控製進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室,有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區的門;

  (2)盡量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉汙染的可能性。

  (3)擴增產物分析區是主要的擴增產物汙染來源,廢液不能在實驗室中傾倒,必須經消毒液浸泡消毒後在遠離實驗室的地方棄掉,用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒後統一處理,如焚燒等;

  (4)擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質,應特別注意實驗人員的安全防護。 3.5完備的實驗室配套設施 完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件,應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器,如超淨工作台、離心機、加樣器等。

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